试题详情
- 简答题已知目的的cDNA序列，拟采用基因工程技术使其在哺乳细胞中表达，请写出设计方案。
- 提取目的基因的mRNA，逆转录生成cDNA，根据已知的cDNA序列设计引物，以cDNA为模板进行PCR，琼脂糖凝胶电泳，纯化PCR产物，用限制性核酸内切酶切割PCR产物和载体，用DNA连接酶连接切割后的PCR产物和载体，将连接产物导入大肠杆菌，筛选阳性克隆，DNA序列分析，提取重组DNA，采用合适的方法将其导入哺乳动物细胞，使目的基因在哺乳动物细胞中得以表达。
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