试题详情
简答题概述基因克隆的基本步骤。
  • 基因克隆的基本步骤有:
    ①用相互配套的1~2种限制酶切割含目的基因的DNA和载体DNA(切);
    ②连接目的基因和载体DNA得到重组载体(接);
    ③将重组载体导入宿主细胞(转),若使用的是质粒载体,称转化,噬菌体载体称转导,病毒载体称转染;
    ④将经过转化(或转导,转染)的细菌或细胞稀释,在加有选择性培养基的平皿培养基或细胞培养板上培养,选择含目的基因的阳性克隆,并用其它方法进一步鉴定(筛);
    ⑤扩大培养选出的阳性克隆(扩)。随后可分离目的基因,或在一定的条件下表达目的基因。
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