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简答题简述禽流感的微生物学诊断。
  • ⑴病料的采集和处理:可采集病鸡呼吸道分泌物、脾脏、血液、脑组织,按1:5的比例加入灭菌的生理盐水或缓冲液,用研磨器将组织研碎制成20%的悬液,反复冻融2-3次,5000r/min离心20分钟,取上清,用灭菌滤器过滤除菌或加抗生素杀灭病料中杂菌。
    ⑵分离培养:将处理好的病料经尿囊腔接种9~11日龄SPF鸡胚,37℃孵育,每天照蛋2次,弃除24小时内死亡胚,收集96小时内死亡胚,96小时内未死亡胚取出。
    ⑶收集鸡胚尿囊液采用血凝试验检查是否有血凝活性并测定其滴度,对有血凝活性分离物应用标准的抗禽流感病毒血清,采用血凝抑制血清学试验对病毒进行鉴定,确定血清型。如血凝试验为阴性者,应在鸡胚上再盲传1~2代,血凝试验仍为阴性者,才能报告接种分离流感病毒为阴性。
    ⑷确定为禽流感病毒后对病毒的致病性做进一步鉴定——致病性试验。
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