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简答题简述病毒的细胞培养的类型以及检测指标。
  • 病毒的细胞培养:是指在一定的条件下,将离体的活细胞培养病毒的方法。细胞培养法为病毒分离鉴定中最常用的方法。常用的细胞有:人胚肾细胞、猴肾细胞(vero细胞„非洲绿猴肾细胞)、人胎盘羊膜细胞、人胚二倍体细胞,以及各种在试管中人工传代的肿瘤细胞株如Hela(宫颈癌)细胞、KB(口腔癌)细胞、Hep-2(咽癌)细胞等制备的单层细胞。
    细胞培养类型:
    ①原代细胞培养:以无菌手续采取动物或人组织如人胚肾、人羊膜、猴肾等,切碎洗净后用胰蛋白酶消化得分散的单个细胞,加培养液在细胞瓶内培养所获得的单层贴壁细胞为原代细胞。
    ②二倍体细胞培养:在体外分裂50-100代后仍保持其二倍染色体数目的单层细胞,常用人胚肺二倍体成纤维细胞。可用于人类病毒的分离或病毒疫苗的生产。
    ③传代细胞系培养:能在体外持续增殖传代的细胞系,多由癌细胞或二倍体细胞突变而成。可用于病毒的分离培养,但不能用来源于肿瘤的传代细胞生产疫苗。
    病毒增殖的检测指标:
    ①细胞变化:出现细胞病变效应(CPE),常见的CPE有四种:
    细胞圆缩、破坏;细胞聚合并堆积成葡萄串状;细胞融合形成多核巨细胞;包涵体形成。
    ②红细胞吸附。
    ③干扰现象。
    ④细胞代谢发生改变
    ⑤免疫学方法检测病毒抗原。
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