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简答题简述β半乳糖苷酶试验(ONPG试验)的原理。
  • 有的细菌可产生β半乳糖苷酶,可分解邻-硝基苯-β-D-毗喃半乳糖苷(O-nitrophenyl-β-D-galactopyranos,ONPG)。ONPG为无色,经β半乳糖苷酶水解后,可生成黄色的邻位-硝基酚(O-nitrophenol)。细菌分解乳糖必须有半乳糖苷渗透酶(galactosidepermease)和β半乳糖苷酶的参加。前者可将乳糖通过细胞壁送到细胞内。后者存在于细菌的细胞内,将进入菌细胞的乳糖分解为葡萄糖和半乳糖。
    具有上述两种酶的细菌可迅速分解乳糖。迟缓分解乳糖的细菌只有β半乳糖苷酶,缺乏半乳糖苷渗透酶,或是其活性很弱,不能很快将乳糖运送到菌细胞内,所以通常需要几天时间乳糖才被分解ONPG与乳糖的分子结构相似,且分子较小,不需半乳糖苷渗透酶的运送就可进人菌细胞内,由菌细胞内的β半乳糖苷酶将其分解为半乳糖和黄色的邻位-硝基酚。采用ONPG试验,可使迟缓分解乳糖的细菌迅速取得阳性结果。
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