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简答题简述如何预防植物组织培养中的污染?
  • (1)防止材料带菌:①必要时在室内或无菌条件下对接种的枝条先进行预培养。②避免阴雨天在田间采取外植体。③在菌类侵入组织内部时除去韧皮组织,只接种内部的分生组织。
    (2)外植体灭菌多次灭菌法或多种药液交替浸泡,常用后者。如:取茎尖、芽或器官作为外植体,预处理后剥去芽上鳞片;然后,将材料放入70%~75%的医用酒精中灭菌数秒钟;再用1:500RoccalB(一种商品灭菌剂名)稀释液中浸5min;放入5%~10%次氯酸钠溶液中,并滴入“吐温80”数滴,灭菌15~30min;最后用用无菌水冲洗5次。或用前一题中介绍的方法来灭菌。
    (3)各种器皿、用具、用品灭菌玻璃器皿可采用湿热灭菌法或干热灭菌法、煮沸法灭菌。金属器械一般用火焰灭菌法或干热灭菌法灭菌。工作服、口罩、帽子等布质品用湿热灭菌法。
    (4)无菌操作室灭菌久不使用的接种室用2%的新洁尔灭或70%的酒精擦洗,并用70%的酒精喷雾,使空间灰尘落。使用前熏蒸消毒或用紫外灯消毒。
    (5)操作人员在接种时严格按照无菌操作的程序进行。
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