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简答题培养基、培养器皿和外植体通常用什么方法灭菌?
  • 培养基一般采用湿热灭菌法,即把分注后的培养瓶置入高压蒸汽灭菌器中进行高温高压灭菌。灭菌前一定要在灭菌器内加水淹没电热丝,千万不能干烧,以防事故发生。待压力达到49.0kPa时,开启排气阀,将内部的冷空气排出;当压力升到108kPa、温度为121℃时,维持15~20min。
    玻璃器皿可采用湿热灭菌法,即将玻璃器皿包扎后放入蒸汽灭菌器中进行高温高压灭菌,灭菌时间25~30min。也可采用干热灭菌法,即将玻璃器皿置入电热烘箱中进行灭菌。
    外植体采用多种药液交替浸泡灭菌法,即把材料放进70%的酒精中,约30s后用无菌水冲洗1次,再在0.1%的升汞(HgCl2)中浸泡5~10min,或在10%的漂白粉澄清液中浸泡10~15min,然后用无菌水冲洗3~5次。
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