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简答题酶的固定化方法主要有哪些?作简单阐述.
  • 将酶用物理或化学的方法固定在不溶于水的载体上,形成一种可以重复使用的酶,叫固定化酶。制备固定化酶的方法很多,有包埋法,吸附法,共价键结合法,以及交联法等
    1.包埋法:将聚合物的单体与酶溶液混合,再借助于聚合助进剂作用进行聚合,酶被包埋在聚合物中以达到固定化。操作简单,可制得较高活力的固定化酶。
    2.吸附法:利用各种固体吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表面而使酶固定化的方法。常用的吸附剂有活性炭,氧化铝,硅藻土,多孔陶瓷,多孔玻璃,硅胶,羧基磷灰石等.操作简便,条件温和,不会引起酶的变性失活,载体价廉易得,可反复使用。但酶与载体结合不太牢固易脱落
    3.共价键结合法:酶蛋白侧链基团和载体表面上的功能基团之间形成共价键而固定的方法。酶与载体牢固,制得的固定化酶稳定性好。但制备过程中反应条件较为强烈,难以控制,易使酶变性失活,且制作手续繁琐。
    4.交联法:利用双功能或多功能试剂在酶分子间或酶与载体间、或酶与惰性蛋白间进行交联反应以制得固定化酶的方法。常用的试剂有戊二醛,己二胺,顺丁烯二酸酐,双偶氮苯等。其中应用最广泛的是戊二醛。制备的固定化酶结合牢固,可长时使用.但由于交联反应较激烈,酶分子的多个基团被交联,酶活力损失较大
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