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简答题举例说明植物细胞培养产酶的工艺流程。
  • 植物细胞培养产酶的工艺过程一般包括愈伤组织的诱导，细胞悬浮培养和酶的分离纯化三个阶级，现以大蒜细胞培养生产超氧化物歧化酶（SOD.为例，说明其工艺过程。
    （1）愈伤组织的诱导：选取结实、饱满、无病虫害的大蒜蒜瓣，在4℃冰箱中放置3周，以打破休眠。去除外皮，先用70%乙醇消毒20秒，再用0.1%氯化汞消毒10min，成0.5cm3左右的小块，植入含有3mg/L2，4-D和1.2mg/L6-BA的半固体MS培养基中，25℃、600lux/12h/d光照的条件下培养18d，诱导得到愈伤组织，每18d继代一次。
    （2）细胞悬浮培养：将上述在半固体MS培养基上培养18d的愈伤组织，在无菌条件下转入含有3mg/L2，4-D和1.2mg/L6-BA的液体MS培养基中，加入灭菌的玻璃珠，25℃、600lux、12h/d的光照条件下振荡培养10~12d，使愈伤组织分散成为小细胞团或单细胞。然后再无菌条件下，经过筛网将小细胞团或单细胞转入含有3mg/L2，4-D和1.2mg/L6-BA的液体MS培养基中，25℃、600lux、2h/d光照的条件下培养18d。
    （3）酶的分离纯化：细胞培养完成后，收集细胞，经过细胞破碎，用pH7.8的磷酸缓冲液提取、有机溶剂沉淀等，分离得到超氧化物歧化酶。

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