试题详情
简答题有机溶剂沉淀（降低介电常数）：
  • 利用酶等蛋白质在有机溶剂中的溶解度不同而使之分离的方法。
    1.淀机理：降低溶液的介电常数；引起蛋白质脱水
    2.用有机溶剂：丙酮乙醇甲醇，用量一般为酶液体积的2倍左右，终浓度为70%。
    3.点：
    优点：
    ①分辨率比盐析法高
    ②沉淀不需脱盐
    ③溶剂易蒸发，沉淀易离心。
    缺点：
    ①容易引起蛋白质变性失活
    ②有机溶剂易燃、易爆，对安全要求较高。
    4.响有机溶剂沉淀的因素
    ①温度：低温（0℃）操作。
    ②pH值：尽可能靠近其等电点。
    ③离子强度：采用<0.05mol/L的稀盐溶液，增加蛋白质在有机溶剂中的溶解度，目的：防止蛋白质变性
    ④蛋白质浓度：适当，一般为5〜20mg/ml

  • 关注下方微信公众号，在线模考后查看

热门试题