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简答题请设计试验，构建理想的小鼠基因组文库。
  • 一、分离纯化基因组DNA。用小鼠的肝脏来提取DNA：
    ①取适量的新鲜肝脏制备组织匀浆。
    ②加入细胞裂解液使细胞充分的裂解。
    ③加入蛋白酶K消化细胞，注意混匀但是不能太剧烈以免DNA断裂。
    ④加氯仿去除蛋白质。混匀后离心后，分三层上层是DNA，这一步吸取上层时最好用剪过的枪头避免吸入蛋白质等杂质。
    ⑤加入异丙醇出现絮状物，离心去除上清液，加入氯化钠溶解沉淀，加入RNA酶去除RNA。
    ⑥乙醇洗涤DNA沉淀，并用TE缓冲液溶解。
    ⑦琼脂糖电泳检测DNA的质量。
    二、切割DNA成合适的片段以用于克隆。将DNA切割成大小为4~10kb的片段。
    三、载体DNA的制备。用λ噬菌体载体。载体用Sau3A酶解，用氯化铯密度梯度离心。
    四、基因组DNA与载体连接。连接反应中要考虑两个因素，即噬菌体两臂DNA插入片段的比例和反应混合液中DNA的浓度。
    五、利用体外包装系统将多联体组装成完整的颗粒。
    六、重组载体转化受体感受态细胞
    七、扩增DNA文库。大肠杆菌的液体培养基的培养。
    八、基因组文库的鉴定。

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