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简答题简述PCR的步骤。PCR是如何使得特异性DNA片段以几何级数倍增的?
  • PCR分三步:
    ①双链模板DNA变性。双链解开成单链。
    ②退火。
    即引物与单链DNA两端互补序列配对,形成DNA聚合反应中的模板与引物的关系。没有引物的帮助,所有的DNA聚合酶都无能力从头合成一条新链。
    ③链的延伸。
    DNA聚合酶从引物3’-OH端开始进行聚合酶反应,直至完全产生两条互补的新链。
    三个反应阶段结束后,又可以开始下一次的循环,引物链的延伸产物与原来的模板DNA经加热变性后,也作为模板DNA和另一个引物互补,在DNA聚合酶作用下又发生引物链的延伸反应。这样反复循环数十次,可使特异性DNA片段以几何级数倍增。
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