试题详情
简答题简述2-3种检测蛋白质间相互作用的方法。
  • （1）酵母双杂交系统：是利用杂交基因通过激活报告基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。真核生物转录因子具有DNA结合结构域（BD）和转录激活结构域（AD），这两个结构域分开时仍分别具有功能，但不能激活转录，只有它们以适当途径在空间上较为接近时，才能重新具有转录因子活性，并激活报告基因表达。
    （2）免疫共沉淀（IP）：基本原理是抗原和抗体之间专一性地相互作用而沉淀，从而保留下来，其是一种经典的检测蛋白质相互作用的方法。其实验过程比较简单，裂解细胞后，加入抗体，抗原被沉淀下来后洗涤，去除非特异性结合，再分析复合体。抗体可以是单克隆，也可以是多克隆。
    （3）蛋白质芯片：蛋白质芯片可以用来大规模筛选蛋白质之间的相互作用，将一个蛋白质芯片与荧光标记的探针蛋白孵育，洗脱非特异性结合的蛋白后，可以通过扫描芯片上的荧光点来检测稳定的相互作用蛋白点。

  • 关注下方微信公众号，在线模考后查看

热门试题