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简答题结晶时酶液有什么要求?结晶方法有哪些?其原理又如何?
  • 结晶时对酶液有以下要求:
    A.酶在结晶之前,酶液必须经过纯化达到一定的纯度。如果酶液纯度太低,不能进行结晶。通常酶的纯度应当在50%以上,方能进行结晶。
    B.酶在结晶时,酶液应达到一定的浓度。结晶时酶液浓度应当控制在介稳区,即酶浓度处于稍微过饱和的状态。
    C.结晶过程中还要控制好温度、pH值、离子强度等结晶条件。
    结晶方法与原理:
    A.盐析结晶法:在适当的温度和pH值等条件下,于接近饱和的酶液中缓慢增加某种中性盐的浓度,使酶的溶解度慢慢降低 ,达到稍微过饱和状态,而析出酶晶体的过程。
    B.有机溶剂结晶法:有机溶剂结晶是在接近饱和的酶液中慢慢加入某种有机溶剂,使酶的溶解度降低,而析出酶晶体的过程。
    C.透析平衡结晶法:将酶液装进透析袋,对一定浓度的盐溶液进行透析,使酶液逐步达到过饱和状态而析出结晶的过程。
    D.等电点结晶法:等电点结晶是通过缓慢改变浓酶液的pH值,使之逐渐达到酶的等电点,而使酶析出结晶的过程。
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