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简答题固定化酶的性质与游离酶相比有哪些方面的变化,主要是哪些方面引起的?
  • 1、酶稳定性的的变化,引起变化的原因:
    (1)固定化后酶分子与载体多点连接,可防止酶分子伸展变形。
    (2)抑制自降解。将蛋白酶与固态载体结合后,由于其失去了分子间相互作用的机会,从而抑制降解并有利于提高稳定性。
    2、固定化酶最适温度的变化,引起变化的原因:
    用不同的方法或载体进行固定化,其最适温度可能不同。
    3、固定化酶最适pH的变化,引起变化的原因:
    (1)载体的带电性质,带负电荷的载体,固定化酶最适pH值比游离酶的高,带正电荷的载体,固定化酶最适pH值比游离酶的低
    (2)产物酸碱性
    酸性:固定化酶的最适pH值比游离酶的高
    碱性:固定化酶的最适pH值比游离酶的低
    4、固定化酶底物特异性的变化,引起变化的原因:
    载体的空间位阻作用
    5、固定化酶活力的变化,引起变化的原因:
    (1)酶分子在固定化过程中,空间构象会有所变化,甚至影响了活性中心的氨基酸;
    (2)固定化后,酶分子空间自由度受到限制(空间位阻),会直接影响到活性中心对底物的定位作用;
    (3)内扩散阻力使底物分子与活性中心的接近受阻;
    (4)包埋时酶被高分子物质半透膜包围,大分子底物不能透过膜与酶接近。
    6、米氏常数Km的变化,引起变化的原因:
    固定化酶的表观米氏常数Km随载体的带电性能变化。由于高级结构变化及载体影响引起酶与底物亲和力变化,从而使Km变化。
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