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简答题说明常用的沉淀试验原理并举一例说明其应用。
  • 可溶性抗原与相应抗体结合,在比例合适的情况下,可形成较大的不溶性免疫复合物,在反应体系中,呈现为不透明的沉淀,或引起光线散射现象,即为抗原抗体反应的沉淀现象,下述几种反应即是属于沉淀反应的几种方式。
    (1)双向免疫扩散:在琼脂凝胶中的一定距离打孔分别放人抗原,抗体,当抗原和抗体向孔四周凝胶中扩散,在一定部位相遇形成沉淀线。可用于对抗体或抗原的定性检测,或判断两种抗原成分的相关性。
    (2)免疫电泳:可对含有多种抗原的材料进行抗原种类分析,即先将抗原材料进行电泳分离,再与相应抗体进行双向免疫扩散,此法常用于血清蛋白种类分析,对于免疫球蛋白缺损(低下)或增多的疾病有重要诊断意义。
    (3)单向免疫扩散:将抗体与琼脂凝胶混合制成凝胶板,将可溶性抗原材料加入到凝胶板的小孔里,抗原由小孔向四周凝胶中扩散,与琼脂中抗体相遇形成沉淀圈,加入抗原浓度与形成的沉淀圈直径成正相关。此法常用于定量测定血清中IgG、IgA、IgM、C3各成分。
    (4)免疫印迹法:这是一种将免疫电泳与标记抗体技术相结合的检测技术,可用于检测样品中某种特异抗原的分子量。此法是先将抗原和分子量标准品在凝胶中电泳,将各成分按分子量大小依次分开,经印迹转移到硝酸纤维素膜上,用酶标抗体溶液浸泡上述硝酸纤维素膜,使抗体与膜上的抗原结合,再用底物显色,确定抗原位置即可得知其分子量。用此法可测定HIV病毒包膜抗原。
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