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简答题鸡马立克氏病病毒的琼脂扩散试验过程及判定。
  • 1.琼脂平板的制备:取优质琼脂粉1克,溶化入8%氯化钠溶液100毫升中;经多层纱布过滤,趁热倾入平皿中,平置凝固;然后按图打孔,孔距约3毫米,孔径约4毫米。
    2.加样:(1)用已知的马立克氏病阳性血清检查未知抗原。将带有羽髓的毛根剪下,置于小试管中,每管加入2—3滴生理盐水,用玻璃棒捻转挤压。然后用毛细滴管吸取浸出液加至外周孔,阳性血清加入中间孔,加满为度,或将羽毛根直接插在阳性血清孔周围。加样完毕,加盖室温静置片刻;待加样稍被吸附下沉后,平放于带盖的湿盒内,置37℃温箱过夜,次日记录结果。(2)用标准抗原检测未知抗体(被检血清)。用吸管将被检血清按顺序逐个滴加外周孔内;每加1份血清前,必须把吸管充分洗净试干。用另一吸管向中心孔滴加标准抗原;加样完毕后稍等片刻,待加样稍被吸附下沉后,加盖平放于湿盒内,置37℃温箱过夜,次日记录结果。
    3.判定结果:(1)如果中间孔和周围孔之间出现一条清晰致密的沉淀线,即为阳性反应,否则为阴性反应。(2)某些被检材料可能产生2—3条沉淀线,则最突出的线称作A线,次要的线为B或C线,都属于阳性反应。
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