试题详情
- 简答题反向斑点杂交
- 是将ASO探针固定在尼龙膜上,用扩增的DNA样品与膜上探针杂交。由于ASO探针长度有限(一般为15~20个碱基),为使探针序列不受固定过程的影响,当ASO合成后,用末端转移酶在其3′端加一上段多聚核苷酸(dT)尾(一般为400个左右),这种带尾的ASO点在膜上后,经紫外光照射,其多聚dT即可与尼龙膜表面的氨基发生作用而结合在膜条上。因点杂交技术是将扩增的DNA样品固定在尼龙膜上,探针游离,而此技术与之相反,所以着这技术叫做反向打点杂交技术。
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