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简答题简述同工酶的分型方法。
  • 1）同工酶的多态性采用凝胶电泳方法进行分型。
    区带电泳：
    利用酶蛋白分子的大小和所携带电荷数量（酶蛋白的电荷密度的差异）→Rf。
    等电聚焦技术：
    根据酶蛋白分子的等电点不同，在pH梯度介质中，酶蛋白分子聚焦在相应的等电点pH位置上，形成狭窄而清晰的区带。
    2）凝胶介质上酶区带的显现及鉴定。
    直接底物显色法：
    常用于测定水解酶，无色底物被酶催化反应转变成有色产物。
    荧光染色法：
    酶催化下，非荧光底物生成高度荧光的产物或使荧光底物转化成非荧光产物（负荧光染色）。
    电子转移染料染色：
    酶催化下，同时NAD+或NADP+还原成NADH或NADPH，同时提供电子。染料还原成暗蓝紫色的不溶性甲月替。

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