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简答题电子显微镜样本的制作与常规病理制片有哪些异同点?
  • 由于电镜的分辨率高,因此电镜样本的处理和超薄切片的制作技术比光镜制片更为精细和复杂,但基本过程是相似的,仍包括组织取材、固定、脱水、浸透、包埋、切片和染色等。
    电镜样本的制备与常规病理制片不同之处有以下几点:
    1.要求组织新鲜,选择无坏死、无出血有代表性的区域进行小块多点取材。组织厚度可为1mm~2mm,再修成lmm的小块,每个样本至少应取4小块到5小块。
    2.双重组织固定,常用的化学固定剂有锇酸、醛类固定剂和高锰酸钾等,所谓双重固定,如先用戊二醛固定,再用锇酸固定,固定液的pH值应小于7.5。
    3.组织包埋用环氧树脂。
    4.1微米厚的半薄切片经甲苯胺蓝或HE染色进行组织定位。
    5、用玻璃刀切制超薄切片,切片厚度为60nm~80nm。
    6、重金属盐染色,如醋酸铀或枸橼酸铅染色等。
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