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简答题写出ALT催化的物质转化反应和连续监测法测定ALT活性时偶联的指示反应,并说出监测吸光度时的波长及在此波长下吸光度的变化。双试剂法是通过先加入缺少哪种物质的底物溶液进行反应,以排除标本中α-酮酸的干扰?
  • L丙氨酸和α-酮戊二酸在ALT的作用下,生成丙酮酸和L-谷氨酸。丙酮酸在乳酸脱氢酶作用下生成L-乳酸,同时NADH被氧化为NAD+,可在340nm处连续监测到NADH的消耗量,从而计算出ALT的活性浓度。
    用双试剂法,首先使血清与缺少α-酮戊二酸的底物溶液混合,37保温5分钟,将标本中所含的α-酮酸消耗完,然后再加入α-酮戊二酸启动ALT催化的反应。
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