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- 简答题双水相萃取的概念是什么?为什么要进行双水相萃取?双水相萃取的主要操作原则是什么?如何做到?
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双水相萃取:
利用被提取物在二相中的分配不同而实现分离的目的;由于蛋白质在有机相中容易失活,因此采用的二相均为亲水相,如PEG/葡聚糖、PEG/无机盐等,称为双水相,两相密度不同,轻相富含一种高分子,重相可能富含另一高分子,细胞碎片和蛋白质在二相间的分配系数不同,从而实现分离的目的。
双水相萃取的一般原则:
一般的原则是将碎片分配在下层(调节PEG和无机盐浓度比例,可以控制细胞碎片在上下层间的分配)其好处有:
核酸等大部分杂质一般处于下相,可以一并除去;
下相是无机盐富集相,作为废弃物成本低些;
蛋白质保持于上相的PEG层有利于其活性的保持;
碎片在下相有利于离心机的连续分离。 关注下方微信公众号,在线模考后查看
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