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简答题基因敲除的基本程序是什么?
  • 通过DNA同源重组,使得胚胎干细胞特定的内源基因被破坏而造成功能丧失,然后通过胚胎干细胞介导得到该基因丧失的小鼠模型的过程称为基因敲除。
    1、打靶载体的构建:同源序列要足够长,要含有筛选用的标志基因。
    2、胚胎干细胞的体外培养
    3、打靶载体导入胚胎干细胞
    4、同源重组胚胎干细胞的筛选
    5、基因敲除胚胎干细胞注射入胚泡
    6、胚泡植入假孕小鼠的子宫中
    7、杂交育种获得纯合的基因敲除动物
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