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简答题简述HPLC柱对介质的要求和羟基磷灰石填料的性能。
  • HPLC柱对于介质的要求和羟基磷灰石作为色谱填充介质的性能主要表现在以下几个方面:
    1)高机械强度在HPLC柱中流动相一般在高压下通过柱,因而要求填充介质具有高的机械强度。现在使用的羟基磷灰石,尤其是球型颗粒可以在15MPa压力下使用,通过强化方法制备的羟基磷灰石既所谓陶瓷羟基磷灰石可在几十兆帕以上的压力下使用。
    2)粒子大小、形状和孔隙填充介质的粒子大小、形状以及表面结构与HPLC柱的理论塔板数直接相关,通常要求有高的理论塔板数。球型羟基磷灰石颗粒大小、性质和孔隙可满足HPLC柱的要求。
    3)化学和热稳定性
    色谱过程是流动相与固定相既填充介质之间频繁强烈接触中完成的,因此要求填充介质在流动相中有很好的化学稳定性。
    羟基磷灰石是磷酸钙盐中最稳定的相,在中性或碱性水相中非常稳定。羟基磷灰石在1400℃才发生相变,热稳定性好。
    4)非可逆吸附为有稳定的柱效和足够长的使用周期,HPLC柱要求填充介质具有低的非可逆吸附。羟基磷灰石的非可逆吸附非常低,满足这一要求。
    5)表面化学修饰为用于高效亲和色谱,要求在填充介质表面配接相应的功能基团。羟基磷灰石表面较易进行各种化学修饰。
    总之,羟基磷灰石作为色谱柱填充介质能提供专一的选择性、高的键和容量、低的非可逆吸附以及化学稳定性和热稳定性好,完全满足HPLC柱的要求。
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