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简答题高效液相色谱法有哪些分离模式？怎样进行选择？
  • 高效液相色谱法按组分在两相间分离机理的不同主要可分为：液固吸附色谱法，液液分配色谱法，化学键合相色谱法，离子交换色谱法和凝胶色谱法（体积排阻色谱法）。 各类型的分离原理以及应用如下：
    （1）液固吸附色谱，利用组分在固定相上的吸附能力不同而分离，采用非极性或弱极性流动相，保留值取决于官能团的类型和数目。应用于分离几何异构体，不同族化合物以及用于纯化制备。
    （2）液液分配色谱，根据物质在两种互不相溶（或部分互溶）的液体中溶解度的不同，有不同的分配，从而实现分离的方法。分配系数较大的组分保留值也较大，最适合同系物组分的分离。
    （3）正相键合相色谱，利用组分在极性键合固定相与弱极性或非极性流动相之间分配系数不同而分离，流动相极性增大，保留值降低分离中等极性化合物。
    （4）反相键合相色谱，采用非极性键合固定相和以水为底溶剂的极性流动相，利用非极性基团的疏水作用和极性基团在流动相中的二次化学平衡，如形成离子对、手性包络物、酸碱平衡等进行分离。可分离极性较小的样品，若利用二次化学平衡，可分离离子、离子型化合物，包括强酸强碱。
    （5）离子交换色谱及离子色谱，组分离子与固定相平衡离子进行动态交换，根据不同组分离子对固定离子基团的亲和力的差别而达到分离的目的。应用于分离离子、离子型化合物或者在一定条件下可解离的化合物。  （6）凝胶色谱，以孔径一定的多孔凝胶为填充剂，样品 按照尺寸差异进行分离。小分子保留值大，大分子保留值小。根据孔径尺寸范围不同，有一定的相对分子质量分离范围，应用于分离高分子、生物大分子等。

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