试题详情
- 简答题什么是免疫印迹技术,并举例说明其中的具体操作。
- 免疫印迹又常称Westernblot,是一综合性的免疫学检测技术。它利用SDS-PAGE技术将生物样品中的蛋白质分子按分子量的大小在凝胶上分离开,然后用电转移的方法将蛋白转移到固相膜上(NC、尼龙或PVDF膜),最后进行免疫学检测。
典型的印迹实验包括五个步骤:
①蛋白样品的制备;
②经过SDS-PAGE分离样品;
③将电泳后凝胶上的蛋白质转移至固体膜上,用非特异性,非反应活性分子封闭固体膜上未吸附蛋白质区域;
④用固定在膜上的蛋白质作为抗原,与固定的非标记抗体结合;
⑤洗去未结合的一抗,加入标记的二抗,通过显色或放射自显影法检测凝胶中的蛋白质成分。 关注下方微信公众号,在线模考后查看
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