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简答题突变基因的高通量筛选技术主要有哪些？各有何特点？
  • 从突变基因文库中筛选目的基因的高通量是筛选技术有多种，常用的有平板筛选法、荧光筛选法、噬菌体表面展示法、核糖体表面展示法等。
    平板筛选是将含有随机突变基因的重组细胞，涂布在平板培养基上，在一定条件下培养，依据重组菌细胞的表型检定出有效突变基因的筛选方法。平板筛选具有简便、快速、直观、容易控制和调整环境条件等特点。
    荧光筛选法是通过荧光产生与否以及荧光的强度情况进行突变基因筛选的方法。荧光筛选法具有直观、明确、容易判断等特点，但是需要利用具有荧光激发特性物质的基因作为报告基因。
    噬菌体表面展示技术是利用丝状噬菌体的外膜结构蛋白与某些特定的外源蛋白或多肽分子形成稳定的复合物，使目标外源蛋白质或多肽富集在噬菌体表面的一种分子展示技术。噬菌体表面展示技术通量大，效率高，有效基因通过噬菌体表面展示进行富集，需要构建外源基因与噬菌体外膜蛋白基因的融合基因。
    细胞表面展示法是通过可以锚在细胞表面的特定蛋白质与外源蛋白质形成融合蛋白，使外源蛋白质富集在细胞表面的一种分子展示技术。细胞表面展示法主要包括酵母细胞表面展示法和细菌细胞表面展示法等。细胞表面展示法通量大，效率高，有效基因通过细胞表面展示进行富集，需要构建外源基因与凝集素蛋白，絮凝素蛋白或者外膜蛋白基因的融合基因。
    核糖体表面展示法是一种在体外筛选和展示功能蛋白的方法。
    核糖体表面展示法具有通量大，筛选效率高，目的蛋白基因在体外进行转录和翻译，有效基因通过核糖体表面展示进行富集等特点。但需要对目的基因进行加工与修饰，使其体外翻译时能够形成目的蛋白-核糖体-mRNA三聚体。

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