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简答题什么是 DNA 甲基化? 简要说明甲基化的检测方法及其生物学效应。
  • DNA甲基化:是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CPG二核苷酸的胞嘧啶5’碳位共价键结合一个甲基基因。其主要形式为5-甲基胞嘧啶(5-mC.、少量的N6-甲基嘌呤(N6-mA.及7-甲基鸟嘌呤(7-mG)。
    DNA甲基化的检测方法:
    (1)重亚硫酸盐(亚硫酸氢盐)修饰:未甲基化的胞嘧啶转化成尿嘧啶;甲基化的胞嘧啶不发生变化。
    (2)用甲基化特异性引物对进行PCR扩增:未甲基化引物对(“U”primers,Tube1);甲基化引物对(“M”primer,Tube2)。
    DNA甲基化的生物学效应:能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。
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