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简答题请你设计一个测定南湖水中大肠菌群最近似数（MPN）的实验方案（包括实验原理或依据、方法、主要用具和实验安排等）。
  • （1）原理：依据大肠菌群的概念。指一群在37度培养24小时能分解乳糖产酸产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
    （2）主要用具：取样瓶、试管、吸管、小倒管、平皿、微量乳糖发酵管、乳糖胆盐发酵管培养基、麦康凯琼脂培养基、革兰氏染色制剂、制抹片的用具、显微镜等。相关用具及培养基等均须灭菌。
    （3）方法：
    1.初发酵试验：将样品做适当稀释，每个稀释度接种3支乳糖胆盐发酵管，置37度恒温箱内，培养24h，如所有发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。
    2.分离培养：将产气的发酵管分别转种在麦康凯琼脂平板上，置37度恒温箱内，培养24h。
    3.复发酵试验：在麦康凯琼脂平板上，挑取红色的大肠菌群可疑菌落1-2个进行革兰氏染色，同时接种微量乳糖发酵管，置37度恒温箱内，培养24h，观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性、无芽胞杆菌，即可报告为大肠菌群阳性；如乳糖管不产气或革兰氏染色阳性，则报告为大肠菌群阴性。
    4.结果报告：根据上述检验结果，按照判定为大肠菌群阳性管数，查相关检索表，按表内所查得的数值，报告大肠菌群的最近似数。
    （4）实验安排：
    第一步：用具的准备及样品的采集。
    第二步：做初发酵试验。
    第三步：做分离培养。
    第四步：做复发酵试验。
    第五步：结果报告。

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