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简答题举例说明酶定向进化技术的应用。
  • 酶定向进化技术主要用于提高酶的催化效率、增强酶的稳定性、改变酶的底物特异性等方面。
    通过酶定向进化可以显著提高酶的催化效率。1993年,陈(Chen,KQ)等人通过易错PCR技术进行定向进化研究,使枯草杆菌蛋白酶在60%的N,N-二甲基甲酰胺进行非水相催化的催化效率提高157倍。显著提高了该酶对有机溶剂的耐受性,大大提高该酶在非水相介质中的催化能力。
    通过酶定向进化可以显著增加酶的稳定性。例如,上述枯草杆菌蛋白酶E通过定向进化,明显提高其热稳定性,其最适作用温度提高17℃,在65℃的半衰期延长50~200倍。
    通过酶定向进行可以改变酶催化作用的底物特异性,使酶对某种底物热异性提高或者降低,甚至呈现出另一种酶的催化活性。例如,2004年,阿哈若尼(AharoniA)等人用基因家族重排技术进行定向进化,使大肠杆菌磷酸酶对有机磷酸酯的特异性提高2000倍。
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