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简答题要测定蛋白质的二硫键位置,需用什么方法?请简述之。
  • 测定蛋白质中二硫键的经典方法是对角线电泳。简言之,先是用专一性适中的蛋白质水解酶,将蛋白质降解为若干片段。随后进行二维纸电泳,在第一相电泳用挥发性的还原剂处理,然后进行第二相电泳。经显色后,在多角线上的肽段均不含有二硫键,而偏离对角线的肽段是形成二硫键的肽段,测定有关肽段的氨基酸组成,即能确定蛋白质肽链中二硫键配对的情况。目前利用质谱技术也可以测定二硫键。
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