试题详情
- 简答题分泌型目的蛋白表达系统的构建策略是什么?
- 包括大肠杆菌在内的绝大多数革兰氏阴性菌不能将蛋白质直接分泌到胞外,但有些革兰氏阴性菌能将细菌的抗菌蛋白(细菌素)分泌到培养基中,这一过程严格依赖于细菌素释放蛋白,它激活定位于内上的磷酸酯酶,导致细菌内外膜的通透性增大。因此,只要将细菌素释放蛋白编码基因克隆在一个合适的质粒上即可构建完全分泌型的受体细胞。此时,用另一种携带大肠杆菌信号肽编码序列和目的基因的表达质粒转化上述完全分泌型受体细胞,并使用相同性质的启动子介导目的基因的转录,则可实现目的蛋白从重组大肠杆菌中的完全分泌。
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