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简答题膜片钳实验的基本操作步骤包括哪些?
  • 1、液体配制:主要根据研究通道的不同,配制相应的液体,基本原则是保持两个平衡:渗透压平衡和酸碱平衡。所有液体在使用前必须过滤。
    2.标本制备
    3.记录
    4、资料分析:
    (1)一般电学性质:通过I-V关系计算单通道电导,观察通道有无整流。通过离子选择性、翻转电位或其它通道激活条件初步确定通道类型。
    (2)动力学:开放时间、开放概率、关闭时间、通道的时间依赖性失活、开放与关闭类型(簇状猝发(Burst)样开放与闪动样短暂关闭(flickering)),化学门控性通道的开、关速率常数等。
    (3)通过对全细胞激活曲线或失活曲线的分析,可得到半数激活或失活电压Vh及斜率因子K。
    (4)药理学:阻断剂、激动剂或其它调制因素对通道活动的影响。
    (5)综合分析得到最后结论。
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