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简答题简述蛋白质质谱分析技术的步骤和原理。
  • 原理：是通过电离源将蛋白质分子转化为离子，然后利用质谱分析仪的电场、磁场将具有特定质量与电荷比值（M/Z）的蛋白质离子分离开来，经过离子检测器收集分离的离子，确定离子的M/Z值，分析鉴定未知蛋白。通常结合相应的处理及其他技术，能够比较准确、快速地鉴定蛋白质。
    步骤：将感兴趣的蛋白点回收后，进行胰蛋白酶胶内酶解，收集酶解肽段。
    一级质谱将蛋白酶降解后的肽段按照质荷比以及强度进行分析，形成肽指纹图谱（PMF）；
    二级质谱是挑选一级质谱中有代表性的母离子峰以诱导碰撞解离方式打碎，形成肽段碎片指纹图谱（PFF）；
    然后一级PMF和二级PFF数据，进行数据库搜索，获取蛋白质的具体鉴定信息。

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