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简答题蛋白质沉淀有哪几类方法?主要基于哪种机理?
  • 有中性盐盐析法,等电点沉淀法,有机溶剂沉淀法,非离子型聚合物沉淀法,聚电解质沉淀法,金属离子沉淀法。
    中性盐盐析法是基于在蛋白质溶液中加入中性盐后会压缩扩散双电层、降低电位,即中性盐即会使蛋白质脱水,又会中和蛋白质所带的电荷,使颗粒间相互排斥力失去,在布朗运动的相互碰撞下,蛋白质分子结合成聚集物而沉淀析出。
    等电点沉淀法是基于不同蛋白质离子具有不同等电点这一特性(蛋白质在等电点时溶解度最小),用依次改变溶液pH值的办法,将杂蛋白沉淀除去。
    有机溶剂沉淀法是基于加入有机溶剂后,会使水溶液的介电常数降低,而使蛋白质分子之间的静电引力增大,导致凝聚和沉淀。
    非离子型聚合物沉淀法是基于体积不相容性。
    聚电解质沉淀法是基于蛋白质与聚电解质结合形成一个多分子络合物,当络合物超过游离蛋白质的溶解度极限值使,就发生沉淀。
    金属离子沉淀法是基于它们能与蛋白质分子中的特殊部位起反应造成的。
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