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简答题如何评价一个酶固定化过程的优劣?
  • 固定化酶的评价指标
    1.固定化酶的活力:基本与游离酶相似,但固定化酶一般用重量或单位表面积来表示,如μmol/(min.mg)或μmol/(min.cm2)
    A.振荡测定法:称取一定量的固定化酶,加入一定量的底物溶液,一边振荡或搅拌,一边进行催化反应,取出一定量的反应液进行酶活力测定。
    B.酶柱测定法:将一定量的固定化酶装进具有恒温装置的反应柱中,让底物溶液以一定的流速流过酶柱,收集流出的反应液,测定其中产物的生成量或底物的消耗量
    C.连续测定法:利用连续分光光度法等测定方法可以对固定化酶反应液进行连续测定,从而测定固定化酶的酶活力。
    2.偶联效率:以载体结合蛋白量(或酶活)占总蛋白量(或总酶活)的百分比。
    3.活力回收:固定化酶所显示活力占总溶液酶活力的百分数。
    4.相对活力:经固定化后固定化酶所显示活力占被固定的等蛋白量溶液酶活力的百分比。
    5.固定化酶的半衰期:在连续测定条件下,固定化酶的活力下降为最初活力一半所经历的时间。可以用实测法或公式推算法。
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