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简答题2-DE的基本操作步骤是什么?
  • (1)样品制备,包括蛋白质的溶解、变性、还原以及去除蛋白质杂质等;
    (2)IPG胶的制备,利用不同pK固定化电解质的组合可配制不同pH范围的凝胶;
    (3)双向电泳,先进行第一向电泳:等电聚焦凝胶电泳,再进行第二向电泳:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;
    (4)蛋白质的染色,电泳后对蛋白质的检测方法有很多种,其灵敏度和分辨率有差异,主要根据上样量的多少及样品进一步分析要求等加以选择,常用的方法有考马斯亮蓝染色、银染、铜染等。
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