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简答题在进行代谢物酶促终点法测定的实验设计时，主要应考虑哪些问题?
  • 主要有下述6个方面：
    (1)所用工具酶的特异性正是因为酶作用具有特异性，所以复杂的生物样品不经分离就可以对其中特定成分进行定量检测，而不受其他物质的干扰。在酶促反应中，要求指示酶要有更高特异性，这样测定所受的干扰会更小。
    (2)酶对待测物的亲和力，即Km的大小要合适在保证测定线性的前提下，Km要尽量小。
    (3)酶的用量酶促终点法测定代谢物的酶用量要足够大，以保证反应能在临床化学检验可接受的较短的时间内(一般为1～3分钟)达到终点。
    (4)工具酶中的杂酶应低于允许限。
    (5)反应平衡点反应应朝正反应方向进行，反应体系中所用的试剂底物对酶应构成“0级反应”。如果反应的平衡常数太低，为使反应朝正反应方向进行，主要有增加底物浓度、偶联反应移去生成物、改变反应pH等方法。
    (6)对于试剂中的附加剂(如稳定剂、防腐剂、赋形剂)加入后，应不抑制酶的活性，不影响试剂的稳定性，不与底物和体液中的物质作用。和其他测定方法学一样，酶法测定还要考虑到试剂的稳定性、均一性，测定的准确性、精密度。

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