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简答题简述核酸的性质
  • 1、紫外吸收:嘌呤碱与嘧啶碱具有共轭双键,使碱基、核苷、核苷酸、核酸在260nm处有最大吸收值。
    2、核酸的变性
    (1)降解:指多核苷酸链骨架上的共价键(3’,5’-磷酸二酯键)的断裂。
    (2)变性:指核酸双螺旋区的氢键断裂,不涉及共价键的断裂。
    ①热变性与酸碱变性 :引起核酸变性的因素很多,其中由温度升高引起的变性,叫热变性;由酸碱度改变引起的变性,叫酸碱变性。
    ②DNA熔点(熔解温度、Tm):DNA的热变性是爆发式的,变性作用发生在很窄的温度范围内,通常把DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称为该DNA的熔点。
    影响Tm 值大小的因素:均一性越高,Tm越窄;G-C的含量越高,Tm越高;离子强度(中性盐的浓度)越高,Tm越高;RNA也会发生变性,但Tm较低,变性曲线比DNA缓和。
    ③增色效应:DNA变性后,紫外吸收增加的现象.
    3、核酸的复性
    复性:变性的DNA在适当的条件下,又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构,复性后的DNA,其生物活性能基本恢复。
    退火:指热变性后的DNA慢慢冷却至室温,其理化性质和双螺旋结构得以复原的过程。 减色效应:DNA单链重组(即复性)后,紫外吸收下降的现象.
    4、核酸杂交
    将不同来源的DNA放在试管中,经热变性后,慢慢冷却。若这些异源DNA之间在某些区域有相同的序列,则DNA复性过程中,会形成杂交DNA分子;DNA与互补的RNA之间也可以发生杂交。
    目前实验室中应用最广的是用硝酸纤维素膜作支持物进行的杂交。
    S.outhern 印迹法:DNA-DNA分子杂交技术。
    N.outhern印迹法:DNA-RNA分子杂交技术。
    W.estern 印迹法:利用抗原-抗体反应,分析蛋白质的技术。
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