试题详情
- 简答题cDNA末端快速扩增法的主要操作步骤是什么？
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1.获得高质量总RNA：含有大量完整mRNA、tRNA、rRNA和部分不完整mRNA；
2.去磷酸化作用：带帽子结构的mRNA不受影响；
3.去掉mRNA的5‘帽子结构，加特异性RNA寡聚接头并用RNA连接酶连接；
4.以特异性寡dT为引物，在反转录酶的作用下，反转录合成第一条cDNA链，包含了寡接头的互补序列；
5.分别以第一链cDNA为模板进行RACE反应；
6.将纯化的PCR产物克隆到载体DNA中，进行序列分析。 关注下方微信公众号，在线模考后查看
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