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简答题酶固定化后,性质会发生哪些改变,其原因是什么?
  • (1)固定化对酶活性的影响:
    固定化以后,酶活性下降,反映速率下降。原因是固定化以后,酶结构、构象的变化会导致活性中心的变化,空间位阻、内扩散阻力都会增大
    (2)最适pH的改变:
    酶经固定化后,pH活性曲线及最适pH有时会发生变化.由带负电载体制备的固定化酶的最适pH比游离酶的最适pH为高;而用带正电载体制备的则情况相反;而用不带电的载体,最适PH不变。
    (3)底物特异性的改变:
    固定化酶的活力,一般比天然酶低.其底物特异性也可能发生变化.一般认为酶被固定到载体后可引起立体障碍,使高分子底物与酶分子表面的接近受到干扰,从而显著降低了酶的活性,而低分子底物则受到立体障碍的影响较小,底物分子容易接近酶分子,因而与原酶活力无显著差别.由此看来改变了高分子底物的特异性。
    (4)最适温度的变化:
    酶固定化后,由于热稳定性提高,最适温度一般随之提高。
    (5)动力学常数的变化:载体与底物带相反电荷:由于静电相吸,固定化酶与游离酶相比,表观米氏常数往往减小;载体与底物带相同电荷,固定化酶的表观Km米氏常数往往比游离酶的米氏常数高;若载体与底物有一方不带电,则往住表现米氏常数不变.表观米氏常数的减少,对固定化酶的实际应用是有利的,可使反应更为完全。
    (6)稳定性普遍增加:主要表现在对热的稳定性;对各种有机溶剂及蛋白质变性剂尿素、盐酸胍的稳定性增加;对蛋白水解酶;贮藏的稳定性也有所提高。稳定性增加有利于酶的应用。
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