试题详情
简答题试述以16S rDNA为分子标记对细菌进行分类鉴定的优点和基本操作步骤。
  • 16SrRNA的核苷酸顺序是高度保守的，意味着这些碱基顺序在进化过程中变化很慢，所有它们能精确地指示细菌之间的亲缘关系。 基本操作步骤：
    1） 寡核苷酸编目法：首先将细胞培养在含32P的培养基中以标记16SrRNA，然后提取32P标记的16SrRNA，并用核酸核酸酶分解，形成寡核苷酸。通过纸电泳法分离这些寡核苷酸，测定每个寡核苷酸的碱基顺序。通过比较16SrRNA碱基顺序的“目录”确定它与其它微生物间的关系。
    2） 反转录法：将16SrRNA提取并纯化，然后用反转录酶和保守引物进行双脱氧终止法，再测定序列。
    3） 直接测序法：首先分离和纯化总DNA，作为模板，然后采用PCR扩增16SrRNA，纯化后的PCR产物采用自动测序仪进行序列测定。

  • 关注下方微信公众号，在线模考后查看

热门试题