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简答题某同学在实验室因操作不慎，所保藏的Bacillus subitis和Lentinus edodes菌种被E.coli污染了，请问他应该如何将这两种菌种纯化？
  • Bacillus subitis的纯化:
    1）制备无菌水和牛肉膏蛋白胨培养基平板，将菌苔刮下，用无菌水制成菌悬液；
    2）将菌悬液置于100℃沸水浴中，保温5分钟；
    3）将保温后的菌悬液按倍比稀释，使每ml稀释菌悬液中含菌约200-300个，吸取0.1ml稀释菌悬液涂平板，置于30℃下培养2天；
    4）待平板上长出菌落后，挑取表面干燥的菌落，镜检并革兰氏染色鉴定该菌落为Bacillus subitis菌；
    5）挑出该单菌落，进一步采用平板划线分离纯化。
    Lentinus edodes的纯化：将菌丝连同培养基一起挖出，制备PDA平板，在平板中央放置一个已灭菌的牛津杯或空心玻璃管，在牛津杯或空心玻璃管中央接种，待菌丝长出后，切取菌丝尖端纯化，转管。或配制Martin培养基，加入链霉素，配成30μg/mL浓度，接种后取单菌落转管。

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