试题详情
简答题简述采用鸡胚进行流感病毒分离培养的操作步骤。
  • 1）标本接种：
    ①选9～11日龄鸡胚，用验蛋器检查后，弃去死胚及发育不好的鸡胚，在照卵灯上画出气室及胚胎位置。
    ②鸡胚气室朝上，75%酒精消毒后，在气室端近胚胎处用钻孔器钻一个小孔，用无菌尖吸管向小孔内加1滴无菌液体石蜡，使胚胎更清晰。
    ③用1ml注射器吸取处理过的标本，以10～20角度插入鸡胚颚下胸前，在羊膜腔内接种0.2ml，再将针头稍后退，于尿囊腔内接种0.2ml，每份标本接种3个鸡胚。
    ④接种后用胶布封口，放34℃温箱孵育72h。
    2）收获：
    ①收获前将鸡胚放4℃冰箱过夜。
    ②70%酒精消毒鸡胚气室部分，用镊子去掉气室部的蛋壳。
    ③用眼科镊子小心撕破壳膜及尿囊腔，将鸡胚轻轻推向一侧。
    ④用毛细管吸取尿囊液，装入小试管内。
    ⑤将羊膜提起呈伞状，将毛细管插入，吸取羊水。
    ⑥在有机板上每个鸡胚的尿囊液和羊水各加2滴及等量1%鸡血球，摇匀，室温放置45分钟后看结果。出现凝集为阳性，用血凝试验测定效价，如滴度低或阴性则混合每份标本的收集液，盲传二代，仍为阴性可报告结果为阴性。

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