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简答题简述红细胞凝集抑制试验原理及方法。
  • 1）原理：当血清中特异性抗体与流感病毒血凝素结合后，则可以抑制红细胞凝集的出现。即为红细胞凝集抑制实验（HAI）。
    2）操作方法：第一步：制备用于红细胞凝集抑制试验的4个血凝单位的抗原。计算需用的病毒量，按血凝试验测定的病毒效价除以8，得到的商即为4个血凝单位的稀释度。配成后进行复核测定：取50μL稀释好的抗原，用等量PBS做2倍系列稀释（同病毒滴定）后加入50μL红细胞悬液，至室温孵育30～60分钟观察凝集结果。4个血凝单位抗原必须每次用前新配制。第二步：稀释血清。
    ①在U型微孔板中，每孔加入PBS25μL。
    ②在A列中加入25μL已用RDE处理的分型血清。
    ③从A-H列做2倍稀释，从H列吸出25μL弃去。第三步：加入4个血凝单位抗原。
    ①加入待分型的4个血凝单位抗原。
    ②用振荡器振荡混匀。
    ③室温放置30分钟。④每孔加入50μL0.5%的豚鼠血球。
    ⑤用振荡器振荡混匀。
    ⑥室温放置1小时。第四步：结果判断。红细胞凝集抑制效价是指抑制红细胞凝集出现时血清的最高稀释度的倒数。

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