试题详情
- 简答题简单说明DNA重组技术中的蓝白斑筛选原理。
-
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性,但它们同时存在时,可形成具有酶学活性的蛋白质。这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补,称为α-互补。
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。 关注下方微信公众号,在线模考后查看
热门试题
- 环境温度过低,产乳量也会下降。但品种不同
- 以下()农药标签属于不规范标签。
- 烟青虫和棉铃虫对辣椒的蕾、花、嫩茎、叶和
- 分枝结薯期
- 为什么芝麻生产栽培中要“打顶不打叶”?
- ()()()和()等构成了农业物料的光学
- 农业植物检疫范围包括什么?
- 沼气池出现负压的原因是什么?
- 植物的繁殖方式除了有性繁殖(也就是种子繁
- 什么是旱作节水农业?
- 种子的胚由()构成。
- 下列()农药是植物生长调节剂?
- 油菜的产量构成中除花序,形成的角果外,还
- 冬瓜上常见的病害有哪些?(列举3种以上)
- 畜禽粪便堆肥关键技术是什么?
- 尿素施用应注意哪些问题?
- 气流对畜禽健康有何影响?
- 常见的土壤结构体中,对土壤肥力来说最理想
- 幅宽
- 如何创建一个实用的植物生物反应器?请举例