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简答题请以CM-C为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些?并说出各种方法的洗脱原理。
  • 无论是升高环境的pH还是降低pH或是增加离子强度都能将被吸附物质洗脱下来。现以羧甲基纤维素为例加以说明,图中H2N-P表示蛋白质,C表示纤维素。
    (1)、升高环境的pH,使蛋白质在此pH下失去电荷,从而丧失与CM-C结合力而被洗脱下来。
    (2)、降低环境的pH,使CM-C在此pH下不解离,从而不能吸附蛋白质而被洗脱下来。
    (3)、用高浓度的同性离子根据质量作用定律将目的物离子取代下来。
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