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简答题简述冻精的原理及牛冻精的制作。
  • 冻精的原理:精子在冷冻状态下,代谢几乎停止,生命以相对静止保存下来,一旦升温又能复苏而不失去受精能力。复苏的关键在于在冷冻过程中,精子在冷冻保护剂的作用下,防止了细胞内水的冰晶化所造成的破坏作用。
    冻精制作:
    1.采精检查按常规方法采取种公牛的精液,并对其精液进行常规检查。
    2.配制稀释液和解冻液冷冻保存稀释液的成分应具有低温保存剂(卵黄、奶类)、防冻剂(甘油)、维持渗透压物质(糖类、柠檬酸钠等)、抗菌素及其他添加剂。
    3.稀释一次稀释法:常用于颗粒精液,将含有抗冻剂的稀释液按比例一次加到精液内。二次稀释法:等温条件下用不含甘油的Ⅰ液做第一次稀释,经过40到60分钟缓慢降至4到5℃,再加入含有甘油的Ⅱ液稀释。三次稀释法:猪精液常采用这种稀释方法。
    4.平衡(O一5℃)方法将稀释好的精液塞上瓶塞,用少量棉花或3—4层纱布包裹,放入冰箱或广口瓶内,在0—5℃条件下放置1—2小时或4—5小时(如精液稀释后过多,可分装于5—10毫升小瓶内进行平衡)。
    5.冻结方法:
    (1)干冰埋藏发法:以干冰为冷源,将干冰置于木盒上,铺平压实后,用模板在干冰上压孔,然后将经过降温平衡至5℃的精液滴入压孔内。再用干冰封埋2到4分钟,收集冻精放入液氮或干冰内储存。
    (2)液氮熏蒸法:以液氮为冷源,通过调节距液氮的距离和时间掌握降温速度。在装有液氮的广口瓶或者铝盒上,置一铜丝网上,距液氮面1~3cm处预冷数分钟,使其温度维持在-80~-100℃。也可用聚四氟乙烯板代替铜丝网,当精液颜色变白时,将颗粒精液收集于储瓶内,移入液氮罐储存。
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