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简答题细胞培养液配置的技术要点()
  • (1)水:水对维持培养细胞的生命活动是十分重要的。在培养用液中任何对细胞有害的杂质都会影响培养细胞的生存。一般培养细胞用液需用新鲜三蒸水配制。
    (2)平衡盐液:由生理盐水和葡萄糖制成,用于维持细胞渗透压、调节培养液酸碱平衡。常用Hanks液和Earls液。
    (3)培养基pH调整液:常用不同浓度的NaHCO3液。
    (4)细胞消化液:主要有胰蛋白酶溶液和乙二胺四乙酸二钠(EDTA)。使用时通常将二者按不同比例混合。
    (5)抗生素溶液:常用抗生素有青、链霉素、卡那霉素和制菌霉素。
    (6)消化酶抑制剂:在无血清培养时加入消化酶抑制剂,可以保护细胞免受残留消化酶的过度消化作用带来的影响。
    (7)谷氨酰胺补充液:在细胞代谢过程中起重要作用,一般配置为100倍的浓缩液,配置时应加温至30℃。,完全溶解后过滤除菌,分装成小瓶-20℃储存。
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