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简答题培养细胞的主要污染与排除
  • （1）细菌的污染及检测。当受到细菌污染时，培养液很快颜色变黄，产生大量酸性物质。显微镜下观察可见培养液中有大量圆球状颗粒漂浮，细胞表面和周围有大量细菌存在，细胞停止生长、中毒、崩解死亡。
    （2）真菌的污染及检测。真菌污染最为常见，污染也容易发现。在培养液表面会出现白色或浅黄色漂浮物。显微镜下可见细胞之间有纵横交错穿行的丝状、管状及树枝状菌丝。
    （3）支原体的污染及检测。支原体的污染是一个常见而棘手的问题，外观上看不出明显的变化，实际上或多或少的影响到细胞的众多机能。目前尚无有效的防范措施。可通过支原体培养、PCR及电镜观察等方法进行检测。
    （4）病毒的污染及检测。病毒的污染主要是通过DNA的整合，改变培养细胞的生物学性状，影响细胞的生长或干预实验结果的准确性。对病毒的检测主要有直接观察、动物接种检查、电镜观察、免疫学及PCR法。
    （5）细胞交叉污染及检测。在培养的细胞中混杂有其它细胞，从而对培养的细胞产生形态或生长特性等方面的影响。常采用形态观察或检查细胞的标记物进行检测。
    有效防治采取的措施：
    1）严格操作，器具分明，空间隔离；
    2）细胞的取放严禁接触培养液瓶口；
    3）对培养的细胞要有充足的储备。

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